是指通过SDS-PAGE 胶将不同分子量的蛋白分离开，然后将目标蛋白转移到PVDF 膜上，再利用抗原抗体的特异性结合，用特异性的一抗结合目标蛋白，用HRP 标记的二抗结合一抗，再加以ECL 发光液显色，检测目的蛋白在不同处理的样本中表达量的高低变化。
Western Blot显色的方法主要有以下几种：
1. 放射自显影
2. 底物化学发光ECL
3. 底物荧光ECF
4. 底物DAB呈色
Western Blot实验步骤：
1. 细胞总蛋白提取；
2. 组织总蛋白提取；
3. 浆蛋白核蛋白提取（细胞核蛋白与细胞浆蛋白抽提试剂盒）；
4. 蛋白浓度测性；
5. 蛋白变性；
6. SDS-PAGE电泳；
7. 转膜；
8. 免疫反应；
9. 化学发光；
10. 凝胶图像分析。
