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免疫荧光
    发布时间: 2021-11-21 09:23    

免疫荧光技术又称荧光抗体技术,是标记免疫技术中发展最早的一种。荧光色素不但能与抗体球蛋白结合,用于检测或定位各种抗原,也可以与其他蛋白质结合,用于检测或定位抗体。

 


免疫荧光

技术特点:

优点:特异性强、敏感性高、速度快;

缺点:非特异性染色问题尚未完全解决,结果判定的客观性不足,技术程序也还比较复杂。

实验方法:

直接法测抗原:荧光素标记在相应的抗体上,直接与相应抗原反应。其优点是方法简便、特异性高,非特异性荧光染色少。缺点是敏感性偏低;而且每检查一种抗原就需要制备一种荧光抗体。此法常用于细菌、病毒等微生物的快速检查和肾炎活检、皮肤活检的免疫病理检查

间接法测抗体:染色程序分为两步,第一步,用未知未标记的抗体(待检标本)加到已知抗原标本上,在湿盒中37保温30min,使抗原抗体充分结合,然后洗涤,除去未结合的抗体。第二步,加上荧光标记的抗球蛋白抗体或抗IgG、IgM抗体。如果第一步发生了抗原抗体反应,标记的抗球蛋白抗体就会和已结合抗原的抗体进一步结合,从而可鉴定未知抗体。